人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(英文名：Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC)在進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常選用的細(xì)胞模型為人 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells，簡(jiǎn)稱HUVECs)。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。

細(xì)胞檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

細(xì)胞培養(yǎng)信息：

1）每2-3天換液一次

2）貼壁生長(zhǎng)

3）內(nèi)皮細(xì)胞樣

4）可傳5代左右

5）培養(yǎng)基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

細(xì)胞到貨須知

1. 請(qǐng)客戶收到本公司原代細(xì)胞產(chǎn)品后，立即對(duì)物品包裝、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等拍照，如有疑問(wèn)或問(wèn)題，須在24小時(shí)內(nèi)通知本公司，提供照片和書面說(shuō)明。客戶收到非凍存原代細(xì)胞后，用75%酒精擦拭瓶身，再將原裝的原代細(xì)胞瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，1-4小時(shí)后再使用，吸取瓶中培養(yǎng)液，換6ml完Q培養(yǎng)液。注意觀察細(xì)胞情況，待貼壁率達(dá)到90%以上再按傳代說(shuō)明操作。請(qǐng)客戶使用T25細(xì)胞瓶傳代，一瓶傳二瓶。

2. 謹(jǐn)記：培養(yǎng)原代細(xì)胞前三天，需對(duì)原代細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行拍照并注明和標(biāo)記時(shí)間。若原代細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)存在質(zhì)量問(wèn)題，需向本公司提供原代細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)的照片和書面說(shuō)明。請(qǐng)客戶使用原代細(xì)胞第3代以內(nèi)。原代細(xì)胞培養(yǎng)傳代過(guò)多，可能造成原代細(xì)胞的質(zhì)量問(wèn)題。

細(xì)胞培養(yǎng)

1.顧客收到T25瓶裝的細(xì)胞如果沒(méi)長(zhǎng)滿，建議先放培養(yǎng)箱2-4小時(shí)

2.吸去培養(yǎng)液，取部分放入50ml離心管，放置于培養(yǎng)箱（放2-3天，觀察是否有污染）

3.加PBS清洗1-2遍，去PBS。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。1-2天換一次液（如果培養(yǎng)液變黃，必須盡快換液）

細(xì)胞傳代

1.細(xì)胞密度到達(dá)90%，可以進(jìn)行傳代。

2.吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤(rùn)洗10秒，

3.加12ml完 Q培養(yǎng)基，吹打均勻，即可分到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶里。（原代細(xì)胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板，建議先包被）

細(xì)胞凍存

1.選擇指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍。去PBS，加入0.25%胰酉每1.5ml潤(rùn)洗10秒，去胰酉每。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細(xì)胞直至細(xì)胞變圓，拍打瓶側(cè)使細(xì)胞脫落。

2.加1-1.5ml成品凍存液（本公司有賣的，無(wú)血清低DMSO，無(wú)需程序凍存），分裝至2ml凍存管里，放-80度冰箱過(guò)夜。第二天再轉(zhuǎn)至液氮

細(xì)胞復(fù)蘇

1.從液氮罐取凍存管，凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。

2.在超凈臺(tái)將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶，再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基

3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可