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產(chǎn)品中心

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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心細(xì)胞系鵪鶉?yán)w維肉瘤細(xì)胞

鵪鶉?yán)w維肉瘤細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

鵪鶉?yán)w維肉瘤細(xì)胞(如QT35)是日本鶉經(jīng)甲基膽蒽誘導(dǎo)的纖維肉瘤細(xì)胞系,貼壁生長(zhǎng),呈成纖維細(xì)胞樣。該細(xì)胞對(duì)多種禽類病毒(如勞斯肉瘤病毒)高度敏感,廣泛用于病毒學(xué)研究。培養(yǎng)于EMEM+10%FBS,37°C、5% CO?。

更新時(shí)間:2026-03-09
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應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

鵪鶉?yán)w維肉瘤細(xì)胞

鵪鶉?yán)w維肉瘤細(xì)胞(Quail Fibrosarcoma Cell Kit),是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的科研專用檢測(cè)試劑盒,可特異性檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)樣本中核心標(biāo)志物、增殖凋亡相關(guān)蛋白、信號(hào)通路分子及病毒感染相關(guān)因子的含量,也可用于該細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中增殖活性監(jiān)測(cè)、腫瘤特性鑒定、藥物干預(yù)效果評(píng)估及病毒敏感性檢測(cè),經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn),無(wú)交叉反應(yīng),檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無(wú)試劑降解、雜菌污染等問(wèn)題。該細(xì)胞以經(jīng)典QT6細(xì)胞系為代表,由甲基膽蒽誘導(dǎo)的日本鵪鶉?yán)w維肉瘤衍生,呈貼壁梭形生長(zhǎng),具有致瘤性,對(duì)禽肉瘤病毒、馬立克氏病病毒等多種病毒敏感,核心免疫表型為波形蛋白(Vimentin)強(qiáng)陽(yáng)性,結(jié)蛋白(Desmin)、S-100等陰性,廣泛應(yīng)用于禽類腫瘤發(fā)病機(jī)制、病毒學(xué)研究、抗腫瘤及抗病du藥物篩選等領(lǐng)域,是評(píng)估該細(xì)胞功能、腫瘤特性及藥物/疫苗干預(yù)效果的重要研究模型,可用于驗(yàn)證抗腫瘤藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及疫苗免疫原性相關(guān)研究。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速,可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量,廣泛應(yīng)用于禽類腫瘤科研、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥物研發(fā)及疫苗候選物評(píng)估等領(lǐng)域,是科研領(lǐng)域的核心相關(guān)檢測(cè)工具。

檢測(cè)原理

本試劑盒的核心檢測(cè)原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦相關(guān)細(xì)胞檢測(cè)指標(biāo)(核心標(biāo)志物、增殖凋亡蛋白、信號(hào)通路分子、病毒感染相關(guān)因子等)的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合該細(xì)胞功能檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì):試劑盒預(yù)先將目標(biāo)檢測(cè)指標(biāo)(如Vimentin、Ki-67、PDGFR-β、病毒囊膜蛋白等)特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測(cè)樣本(相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液等)后,樣本中的目標(biāo)指標(biāo)會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、細(xì)胞碎片、無(wú)關(guān)細(xì)胞因子及其他禽類組織相關(guān)蛋白后,加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“包被抗體-目標(biāo)指標(biāo)-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中目標(biāo)指標(biāo)的含量呈正相關(guān),通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm主波長(zhǎng)(參比波長(zhǎng)630nm)下測(cè)定吸光度(OD值),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中目標(biāo)指標(biāo)的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范:樣本采集后需及時(shí)處理(相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清離心分離、細(xì)胞裂解液制備),按照試劑盒說(shuō)明書稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照,37℃孵育30分鐘;洗滌5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌5次后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,計(jì)算檢測(cè)結(jié)果,全程約2.5小時(shí)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對(duì)相關(guān)細(xì)胞指標(biāo)檢測(cè)需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:

1.  特異性優(yōu)異:采用針對(duì)禽類Vimentin、PDGFR-β等靶點(diǎn)的高特異性單克隆抗體,與鵪鶉正常成纖維細(xì)胞、其他禽類腫瘤細(xì)胞系的雜蛋白無(wú)交叉反應(yīng),檢測(cè)特異性>99%,確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避相關(guān)檢測(cè)中的干擾因素,同時(shí)可有效區(qū)分腫瘤特異性標(biāo)志物的假陽(yáng)性與真實(shí)表達(dá)水平;

2.  質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過(guò)靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè),附完整QC報(bào)告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.08ng/mL,符合科研標(biāo)準(zhǔn),可精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)指標(biāo)的微量變化,助力藥物/疫苗干預(yù)效果及腫瘤特性評(píng)估;

3.  操作便捷:試劑盒含全套預(yù)配試劑(包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、濃縮洗滌液等),無(wú)需額外配制核心試劑,步驟簡(jiǎn)化,全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成,適配常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作,新手易上手;

4.  樣本兼容廣:可適配相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、荷瘤鵪鶉血清/腫瘤組織勻漿等核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無(wú)需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè),適配細(xì)胞培養(yǎng)、病毒培養(yǎng)、藥物篩選、腫瘤學(xué)研究等多場(chǎng)景樣本;

5.  適配場(chǎng)景廣:可用于相關(guān)細(xì)胞增殖活性監(jiān)測(cè)、腫瘤特性鑒定、信號(hào)通路(PDGFR-β)研究、抗腫瘤藥物篩選、病毒感染效率評(píng)估及疫苗研發(fā)效果檢測(cè),適配禽類腫瘤學(xué)、病毒學(xué)、藥物研發(fā)等多領(lǐng)域科研需求。

適用樣本類型

本試劑盒適配相關(guān)細(xì)胞樣本的體外科研檢測(cè),適用樣本類型明確及處理要求如下:相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本(對(duì)數(shù)期細(xì)胞上清,12000rpm離心5分鐘,去除細(xì)胞碎片,適用于分泌型因子、病毒相關(guān)指標(biāo)檢測(cè));細(xì)胞裂解液樣本(無(wú)菌收集細(xì)胞,用RIPA裂解液(含蛋白酶抑制劑)裂解,離心取上清,適用于細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物、信號(hào)通路分子檢測(cè));荷瘤鵪鶉血清樣本(靜脈采血,室溫靜置后離心,避免溶血,4℃短期保存,適用于體內(nèi)腫瘤負(fù)荷、藥物代謝相關(guān)檢測(cè));腫瘤組織勻漿樣本(取新鮮腫瘤組織,研磨后用PBS勻漿,離心取上清,適用于體內(nèi)腫瘤標(biāo)志物表達(dá)分析)。推薦檢測(cè)體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀需具備450nm/630nm雙波長(zhǎng)功能;樣本稀釋比例為培養(yǎng)上清1:5、細(xì)胞裂解液1:10、組織勻漿1:8(可根據(jù)實(shí)際濃度調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間以說(shuō)明書為準(zhǔn)。(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書,該細(xì)胞為貼壁梭形細(xì)胞,培養(yǎng)需遵循貼壁細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)范,推薦使用Ham's F12K(含2mM L-谷an酰胺、1.5g/L碳suan氫鈉)添加10%胰蛋白胨磷酸鹽肉湯、5%小牛血清,或Ham's F10添加10%胎牛血清;培養(yǎng)條件為37℃、5%CO?,傳代比例1:2~1:4,75%匯合度時(shí)傳代,可通過(guò)機(jī)械吹打或低濃度yi酶(含PVP)消化,避免細(xì)胞聚團(tuán);凍存液建議為95%培養(yǎng)液+5%DMSO,液氮保存,傳代代次控制在低代次以維持腫瘤特性與病毒敏感性)

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

1.  試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失;

2.  標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開(kāi)封后,密封冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)用完,目標(biāo)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞,底物液需避光保存;

3.  樣本采集后及時(shí)處理,相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),禽類血清、腫瘤組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)降解,細(xì)胞樣本需新鮮采集,避免細(xì)胞活力下降、貼壁能力異常及病毒敏感性降低影響檢測(cè)結(jié)果;

4.  操作時(shí)嚴(yán)格遵循無(wú)菌規(guī)范,佩戴防護(hù)用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測(cè)過(guò)程中控制孵育溫度與時(shí)間,洗滌充分,避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差;

5.  底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時(shí)需謹(jǐn)慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板;

6.  相關(guān)細(xì)胞樣本需無(wú)菌采集與處理,細(xì)胞裂解液需充分裂解細(xì)胞,離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測(cè),避免雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果;培養(yǎng)上清需在細(xì)胞對(duì)數(shù)期采集,避免細(xì)胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)指標(biāo)降解,同時(shí)避免培養(yǎng)體系中血清濃度過(guò)高影響檢測(cè)準(zhǔn)確性,藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)及病毒感染實(shí)驗(yàn)中需設(shè)置空白對(duì)照與陰性對(duì)照,排除藥物、病毒本身對(duì)顯色反應(yīng)的干擾,病毒感染檢測(cè)中需注意樣本采集時(shí)機(jī)以捕捉病毒增殖峰值。

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