C57小鼠黑色素瘤瘤株
C57小鼠黑色素瘤瘤株核心產品為從C57BL/6小鼠黑色素瘤組織中分離、永生化構建的穩(wěn)定細胞株，核心提供B16、B16-F10兩種常用亞型（B16為基礎亞型，B16-F10侵襲轉移能力更強），可提供不同傳代次數(shù)的細胞系，配套提供細胞培養(yǎng)說明書、細胞凍存液、復蘇液及質量檢測報告（含細胞純度、黑色素標志物鑒定、支原體檢測、相關基因表達檢測等），同時提供細胞培養(yǎng)技術支持及定制化實驗服務。該瘤株采用胰dan白酶消化、密度梯度離心等成熟分離技術，從C57BL/6小鼠黑色素瘤組織中去除正常黑色素細胞、成纖維細胞等雜細胞，通過黑色素瘤特異性標志物（如MAGE-A3、MART1、PAX3、酪an酸酶）鑒定，確保細胞純度≥98%，無支原體、細菌、真菌污染，細胞活性≥90%。該瘤株適配常規(guī)貼壁細胞培養(yǎng)條件，可穩(wěn)定傳代，生物學特性穩(wěn)定，保留其惡性增殖、黑色素分泌及侵襲轉移潛能，廣泛應用于黑色素瘤發(fā)病機制研究、腫瘤侵襲轉移實驗、靶向藥物篩選、免yi治療相關實驗及基因功能驗證等科研場景，依托C57BL/6小鼠補體活性高、干擾素產量較高、易誘發(fā)免疫耐受性的遺傳特性，適配腫瘤學、免疫學相關研究，為腫瘤學、分子生物學、免疫學等相關領域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細胞模型，適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院腫瘤科科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該瘤株的分離與培養(yǎng)核心基于腫瘤組織消化分離及永生化技術，結合C57小鼠黑色素瘤細胞貼壁生長、惡性增殖的生物學特性，實現(xiàn)細胞的精準分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng)，具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分：一是細胞分離原理，選取接種黑色素瘤細胞后形成腫瘤的健康C57BL/6小鼠，無菌操作下取出腫瘤組織，碎至1mm3大小的組織塊，加入0.25%胰dan白酶-EDTA消化液（B16-F10可選用不含EDTA的yi酶），37℃水浴消化20-30分鐘，期間每5-10分鐘搖動一次，消化完成后加入含胎牛血清的培養(yǎng)基終止消化，用PBS漂洗2-3次，800r/min離心5分鐘棄去上清液，通過密度梯度離心去除雜細胞，利用黑色素瘤特異性標志物篩選，獲得高純度該瘤株；二是細胞培養(yǎng)原理，將分離獲得的該瘤株接種于培養(yǎng)瓶中，使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，添加青mei素、鏈mei素雙抗，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)基可維持細胞的惡性增殖活力，同時保留其黑色素分泌、侵襲轉移及相關基因表達特性，定期更換培養(yǎng)基（每2-3天一次），待細胞融合度達80%-90%時進行傳代，確保細胞正常生長，避免細胞老化或凋亡。此外，所有分離培養(yǎng)的該瘤株均需經(jīng)過細胞活性檢測、純度鑒定、黑色素標志物檢測及污染檢測，確保細胞的穩(wěn)定性和可靠性，為后續(xù)科研實驗提供優(yōu)質細胞模型，同時可通過優(yōu)化培養(yǎng)體系，模擬體內黑色素瘤微環(huán)境，提升細胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產品特點
該瘤株以“純度高、活性強、特征典型、適配性廣"為核心，貼合C57小鼠遺傳背景及黑色素瘤相關研究的實際科研需求，核心特點突出，匹配科研實驗對腫瘤細胞模型的核心訴求。一是遺傳背景均一，源自近交系C57BL/6小鼠，基因純合度高，個體差異小，可顯著提升實驗數(shù)據(jù)的可重復性與可比性，同時繼承該品系補體活性高、干擾素產量較高、易誘發(fā)免疫耐受性的特性，適配免yi治療相關研究；二是細胞純度高、無污染，細胞純度≥98%，經(jīng)黑色素瘤特異性標志物鑒定及嚴格污染檢測，無支原體、細菌、真菌及雜細胞污染，確保實驗結果的準確性；三是核心特征典型，不同亞型各具特色，B16瘤株惡性度適中，適用于基礎機制研究，B16-F10瘤株侵襲轉移能力強，適用于轉移相關實驗，均具備黑色素分泌能力，可通過黑色素標志物快速鑒定，同時存在蛋白4.1B表達缺失等典型分子特征，可精準模擬臨床黑色素瘤的病理狀態(tài)；四是生物學特性穩(wěn)定，細胞生長狀態(tài)良好，貼壁性強、增殖迅速，可穩(wěn)定傳代30代以上，傳代過程中惡性表型、黑色素分泌及侵襲轉移特性不丟失，符合科研實驗對數(shù)據(jù)可重復性的核心要求；五是適配性強，可適配體外常規(guī)貼壁細胞培養(yǎng)、MTT增殖實驗、Transwell侵襲/遷移實驗、平板細胞克隆形成實驗、Western blotting檢測、免疫熒光染色、基因轉染、藥物敏感性實驗等多種實驗場景，同時可用于C57BL/6小鼠體內移植實驗，構建皮下移植瘤或肺轉移模型，助力體內外協(xié)同研究；六是操作便捷，提供完整的細胞復蘇、培養(yǎng)、凍存說明書，細胞復蘇成活率高（≥90%），無需復雜實驗設備，常規(guī)貼壁細胞培養(yǎng)條件即可滿足生長需求，適配各類實驗室操作，同時提供黑色素標志物檢測、基因表達驗證等專屬技術指導。
適用實驗場景
該瘤株專為C57小鼠背景黑色素瘤相關科研實驗設計，適配多種體外及體內實驗場景，核心應用包括：一是黑色素瘤發(fā)病機制研究，利用該瘤株探究黑色素瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制，分析蛋白4.1家族、MAGE-A3、MART1等相關基因及信號通路的作用，明確黑色素瘤惡性增殖、侵襲轉移的調控機制；二是腫瘤侵襲轉移研究，利用B16-F10亞型的高轉移特性，開展Transwell、尾靜脈移植肺轉移等實驗，探究黑色素瘤轉移的分子路徑，同時可用于評估高強度聚焦超聲（HIFU）等治療手段對腫瘤轉移的抑制效果；三是藥物篩選與藥效評估，將該瘤株用于黑色素瘤靶向藥物、hua療藥物、免疫調節(jié)劑的篩選，評估藥物對細胞增殖、凋亡、侵襲的抑制效果，同時可用于評估藥物對腫瘤細胞黑色素分泌的影響，為藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型；四是免yi治療相關研究，依托C57BL/6小鼠的免疫特性，將該瘤株用于免疫檢查點抑制劑（如PD-1/PD-L1抑制劑）、CAR-T細胞治療、CSC-DC疫苗等相關實驗，評估免yi治療對黑色素瘤細胞的殺傷效果，探究IL-12等細胞因子對腫瘤免疫微環(huán)境的調控作用；五是基因功能研究，通過該瘤株開展基因過表達、沉默實驗，探究相關基因（如蛋白4.1B、IL-12）對黑色素瘤細胞增殖、凋亡、侵襲的影響，明確其抑癌或促癌作用；六是分子機制驗證實驗，可用于Western blotting、Real-time PCR、流式細胞術等實驗，驗證黑色素瘤相關基因及信號通路的調控機制，為相關研究提供分子層面的數(shù)據(jù)支撐。該瘤株適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實驗室及各級醫(yī)院腫瘤科科研部門，助力相關科研實驗的順利開展。
備注：（具體細胞分離、培養(yǎng)及實驗操作方法請參考產品說明書）
儲存與注意事項
儲存方面，該瘤株凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存，有效期為12個月，凍存時需使用含5-10%DMSO的配套凍存液，采用梯度降溫法凍存（-1~-2℃/min降溫至-25℃以下，再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮），避免細胞損傷；復蘇時需快速解凍（37℃水浴1-2分鐘），解凍后立即用70%酒精消毒凍存管，避免進水污染，復蘇后需立即接種至培養(yǎng)瓶，加入預熱的專用培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，復蘇后24小時內避免更換培養(yǎng)基，確保細胞適應環(huán)境、穩(wěn)定貼壁；常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下，細胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中，使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，定期更換培養(yǎng)基（每2-3天一次），待細胞融合度達80%-90%時傳代，B16傳代可選用含EDTA的yi酶，B16-F10建議選用不含EDTA的yi酶，避免細胞損傷，傳代比例建議為1:3-1:5，避免細胞過度融合導致老化。注意事項包括：產品僅供科研使用，不用于臨床治療診斷；細胞復蘇時需快速解凍，避免反復凍融，解凍后及時接種，防止細胞活力下降，凍存管取出時需注意防護，避免凍傷；培養(yǎng)過程中需嚴格遵循無菌操作原則，禁止共用培養(yǎng)耗材，避免細胞污染，若發(fā)生污染切勿進行半量換液，無菌操作是細胞培養(yǎng)成功的關鍵；細胞傳代時需控制消化時間（3-5分鐘），避免過度消化導致細胞貼壁能力下降，傳代時輕柔吹打，避免劇烈震蕩損傷細胞；檢測過程中（如Western blotting、流式細胞術），需嚴格遵循實驗操作規(guī)范，確保黑色素標志物及相關分子檢測結果準確；過期細胞及污染細胞嚴禁使用，詳細安全信息請參照產品SDS文件；運輸過程中需采用干冰運輸，避免高溫、劇烈震蕩，確保細胞活力，運輸后需及時復蘇或轉移至對應儲存環(huán)境。
訂購信息
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